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菌落總數檢測為什么平板計數瓊脂需要調節pH?

點(diǎn)擊次數:190  更新時(shí)間:2024-06-19

 菌落總數檢測




1.為什么平板計數瓊脂需要調節pH?
  由于大部分細菌是嗜中性的,培養基為符合細菌生長(cháng)要求,需要調節pH至7.0±0.2,盡量保證較適宜的環(huán)境,確保檢測結果的準確性。
2.如何保證檢測結果的有效性?

設計空白對照
(1)檢驗過(guò)程中需要做空白對照,用來(lái)判斷培養基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染,空白試驗平板上應該無(wú)細菌生長(cháng)。

實(shí)驗環(huán)境要求
(2)定期檢測空氣潔凈度,判斷實(shí)驗環(huán)境是否符合標準要求。

滅菌處理
(3)細菌檢測過(guò)程中所用到的一切用具和培養基都需經(jīng)過(guò)滅菌程序。
3.如何提高檢測結果的準確性?


樣品消毒
(1)任何樣品在打開(kāi)包裝前,都要在取樣開(kāi)口處的周?chē)砻孢M(jìn)行消毒。

(2)采樣時(shí)對于易堵塞吸管的樣品(如糕點(diǎn)面包辣條等),可以放置一塊無(wú)菌紗布在放樣液的容器瓶口下方,作過(guò)濾用。


稀釋度選擇
(3)不同的食品其「菌落總數」的檢出也不一致,通常糕點(diǎn)類(lèi)樣品中細菌量偏低,稀釋度應選擇較小的,稀釋度可選1:10 。

糕點(diǎn)的菌落總數標準
4.為什么瓊脂凝固后需要倒置?
  平板倒置培養,可以減少培養基中水分的蒸發(fā)影響細菌生長(cháng),又可以防止凝結在皿蓋上的水蒸氣流到培養基表面導致染菌出現菌落蔓延及難以計數。
5.為什么培養基干裂?
  干裂是培養基的水份缺失導致,通常2種原因:
?。?)培養箱內部溫度不穩定導致;
?。?)培養基倒得太薄。
6.菌落蔓延的原因及解決辦法?
  菌落蔓延主要有兩個(gè)原因,一是操作不當;二是樣品中含有變形桿菌等運動(dòng)性強的細菌。 

操作中需要注意3個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):
(1)傾注培養基時(shí)搖晃平皿使其混合均勻,減少菌塊;
(2)樣品稀釋后,盡快傾注平板。從稀釋到傾注結束時(shí)間控制在30分鐘之內,避免樣液干涸造成菌落成團;平板凝固后馬上倒置;
(3)若樣品中含有變形桿菌,則可以覆蓋一層培養基(約4mL)。
7.異?,F象平板如何進(jìn)行菌落計數?


在完成培養后應立即進(jìn)行計數,通常選取30-300CFU菌落數、無(wú)蔓延菌落生長(cháng)的平板作為計數,但實(shí)際操作中會(huì )出現各種異?,F象。
  我們通過(guò)以下表格查看:
現象
計數方式
無(wú)任何明顯界限的鏈狀菌落
作為一個(gè)菌落
有幾條不同來(lái)源的鏈
每條鏈均應按一個(gè)菌落計算
片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻
半個(gè)平板的菌落數乘2代表整塊平板的菌落數

另外,當所有稀釋度的平板均無(wú)細菌生長(cháng),則檢測報告應以低稀釋度報出,如低稀釋度為1,則報為<1;若低稀釋度為1:10,則報為<10,而不能報為「未檢出」。



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